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范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了一次性使用衛(wèi)生用品的產(chǎn)品和生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、消毒效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和相應(yīng)檢驗(yàn)方法，以及原材料與產(chǎn)品生產(chǎn)、消毒、貯存、運(yùn)輸過(guò)程衛(wèi)生要求和產(chǎn)品標(biāo)識(shí)要求。
在本標(biāo)準(zhǔn)中，一次性使用衛(wèi)生用品是指：
本標(biāo)準(zhǔn)適用于國(guó)內(nèi)從事一次性使用衛(wèi)生用品的生產(chǎn)與銷售的部門、單位或個(gè)人，也適用于經(jīng)銷進(jìn)口一次性使用衛(wèi)生用品的部門、單位或個(gè)人。
引用標(biāo)準(zhǔn)
下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過(guò)在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí)，所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會(huì)被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)新版本的可能性。
GB 15981-1995 消毒與滅菌效果的評(píng)價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn)
定義
本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義：
一次性使用衛(wèi)生用品
使用一次后即丟棄的、與人體直接或間接接觸的、并為達(dá)到人體生理衛(wèi)生或衛(wèi)生保健（抗菌或抑菌）目的而使用的各種日常生活用品，產(chǎn)品性狀可以是固體也可以是液體。例如，一次性使用手套或指套（不包括醫(yī)用手套或指套）、紙巾、濕巾、衛(wèi)生濕巾、電話膜、帽子、口罩、內(nèi)褲、婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品（包括衛(wèi)生護(hù)墊）、尿布等排泄物衛(wèi)生用品（不包括皺紋衛(wèi)生紙等廁所用紙）、避孕套等，在本標(biāo)準(zhǔn)中統(tǒng)稱為“衛(wèi)生用品”。
產(chǎn)品衛(wèi)生指標(biāo)
1 外觀必須整潔，符合該衛(wèi)生用品固有性狀，不得有異常氣味與異物。
2 不得對(duì)皮膚與粘膜產(chǎn)生不良刺激與過(guò)敏反應(yīng)及其他損害作用。
3 產(chǎn)品須符合表1中微生物學(xué)指標(biāo)。
表1
4 衛(wèi)生濕巾除必須達(dá)到表1中的微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)外，對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺滅率須≥90％，如需標(biāo)明對(duì)真菌的作用，還須對(duì)白色念珠菌的殺滅率≥90％，其殺菌作用在室溫下至少須保持1年。
5 抗菌（或抑菌）產(chǎn)品除必須達(dá)到表1中的同類同級(jí)產(chǎn)品微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)外，對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率須≥50％（溶出性）或＞26％（非溶出性），如需標(biāo)明對(duì)真菌的作用，還須白色念珠菌的抑菌率≥50％（溶出性）或＞26％（非溶出性），其抑菌作用在室溫下至少須保持1年。
6 任何經(jīng)環(huán)氧乙烷消毒的衛(wèi)生用品出廠時(shí)，環(huán)氧乙烷殘留量必須≤250μg/g。
生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo)
1 裝配與包裝車間空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤2 500 cfu/m3。
2 工作臺(tái)表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤20 cfu/cm2。
3 工人手表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤300 cfu/只手，并不得檢出致病菌。
消毒效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)
1 環(huán)氧乙烷消毒：對(duì)枯草桿菌黑色變種芽胞(ATCC 9372)的殺滅指數(shù)應(yīng)≥103。
2 電離輻射消毒：對(duì)短小桿菌芽胞E6d(ATCC 27142)的殺滅指數(shù)應(yīng)≥103。
3 壓力蒸氣消毒：對(duì)嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC 7953)的殺滅指數(shù)應(yīng)≥103。
測(cè)試方法
1 產(chǎn)品測(cè)試方法
1.1 產(chǎn)品外觀：目測(cè)，應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn)3.1的規(guī)定。
1.2 產(chǎn)品毒理學(xué)測(cè)試方法：見(jiàn)附錄A。
1.3 產(chǎn)品微生物檢測(cè)方法：見(jiàn)附錄B。
1.4 產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性測(cè)試方法：見(jiàn)附錄C。
1.5 產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量測(cè)試方法：見(jiàn)附錄D。
2 生產(chǎn)環(huán)境采樣與測(cè)試方法：見(jiàn)附錄E。
3 消毒效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)方法：見(jiàn)附錄F。
原材料衛(wèi)生要求
1 原材料應(yīng)無(wú)毒、無(wú)害、無(wú)污染；原材料包裝應(yīng)清潔，清楚標(biāo)明內(nèi)含物的名稱、生產(chǎn)單位、生產(chǎn)日期或生產(chǎn)批號(hào)；影響衛(wèi)生質(zhì)量的原材料應(yīng)不裸露；有特殊要求的原材料應(yīng)標(biāo)明保存條件和保質(zhì)期。
2 對(duì)影響產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量的原材料應(yīng)有相應(yīng)檢驗(yàn)報(bào)告或證明材料，必要時(shí)需進(jìn)行微生物監(jiān)控和采取相應(yīng)措施。
3 禁止使用廢棄的衛(wèi)生用品作原材料或半成品。
生產(chǎn)環(huán)境與過(guò)程衛(wèi)生要求
1 生產(chǎn)區(qū)周圍環(huán)境應(yīng)整潔，無(wú)垃圾，無(wú)蚊、蠅等害蟲(chóng)孳生地。
2 生產(chǎn)區(qū)應(yīng)有足夠空間滿足生產(chǎn)需要，布局必須符合生產(chǎn)工藝要求，分隔合理，人、物分流，產(chǎn)品流程中無(wú)逆向與交叉。原料進(jìn)入與成品出去應(yīng)有防污染措施和嚴(yán)格的操作規(guī)程，減少生產(chǎn)環(huán)境微生物污染。
3 生產(chǎn)區(qū)內(nèi)應(yīng)配置有效的防塵、防蟲(chóng)、防鼠設(shè)施，地面、墻面、工作臺(tái)面應(yīng)平整、光滑、不起塵、便于除塵與清洗消毒，有充足的照明與空氣消毒或凈化措施，以保證生產(chǎn)環(huán)境滿足本標(biāo)準(zhǔn)第5章的規(guī)定。
4 配置必需的生產(chǎn)和質(zhì)檢設(shè)備，有完整的生產(chǎn)和質(zhì)檢記錄，切實(shí)保證產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量。
5 生產(chǎn)過(guò)程中使用易燃、易爆物品或產(chǎn)生有害物質(zhì)的，必須具備相應(yīng)安全防護(hù)措施，符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或規(guī)定。
6 原材料和成品應(yīng)分開(kāi)堆放，待檢、合格、不合格原材料和成品應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi)堆放并設(shè)明顯標(biāo)志。倉(cāng)庫(kù)內(nèi)應(yīng)干燥、清潔、通風(fēng)，設(shè)防蟲(chóng)、防鼠設(shè)施與墊倉(cāng)板，符合產(chǎn)品保存條件。
7進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)要換工作衣和工作鞋，戴工作帽，直接接觸裸裝產(chǎn)品的人員需戴口罩，清洗和消毒雙手或戴手套；生產(chǎn)區(qū)前應(yīng)相應(yīng)設(shè)有更衣室、洗手池、消毒池與緩沖區(qū)，
8 從事衛(wèi)生用品生產(chǎn)的人員應(yīng)保持個(gè)人衛(wèi)生，不得留指甲，工作時(shí)不得戴手飾，長(zhǎng)發(fā)應(yīng)卷在工作帽內(nèi)。痢疾、傷寒、病毒性肝炎、活動(dòng)性肺結(jié)核、尖銳濕疣、淋病及化膿性或滲出性皮膚病患者或病原攜帶者不得參與直接與產(chǎn)品接觸的生產(chǎn)活動(dòng)。
9 從事衛(wèi)生用品生產(chǎn)的人員應(yīng)在上崗前及定期(每年一次)進(jìn)行健康檢查與衛(wèi)生知識(shí)(包括生產(chǎn)衛(wèi)生、個(gè)人衛(wèi)生、有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)范)培訓(xùn)，合格者方可上崗。
消毒過(guò)程要求
1 消毒級(jí)產(chǎn)品終消毒必須采用環(huán)氧乙烷、電離輻射或壓力蒸氣等有效消毒方法，所用消毒設(shè)備必須符合有關(guān)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。
2 根據(jù)產(chǎn)品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、初始污染菌與消毒效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)制定消毒程序、技術(shù)參數(shù)、工作制度，經(jīng)驗(yàn)證后嚴(yán)格按照既定的消毒工藝操作。該消毒程序、技術(shù)參數(shù)或影響消毒效果的原材料或生產(chǎn)工藝發(fā)生變化后應(yīng)重新驗(yàn)證確定消毒工藝。
3 每次消毒過(guò)程必須進(jìn)行相應(yīng)的工藝（物理）和化學(xué)指示劑監(jiān)測(cè)，每月用相應(yīng)的生物指示劑監(jiān)測(cè)，只有當(dāng)工藝監(jiān)測(cè)、化學(xué)監(jiān)測(cè)、生物監(jiān)測(cè)達(dá)到規(guī)定要求時(shí)，被消毒物品才能出廠。
4 產(chǎn)品經(jīng)消毒處理后，外觀與性能應(yīng)與消毒處理前無(wú)明顯可見(jiàn)的差異。
包裝、運(yùn)輸與貯存要求
1 執(zhí)行衛(wèi)生用品運(yùn)輸或貯存的單位或個(gè)人，應(yīng)嚴(yán)格按照生產(chǎn)者提供的運(yùn)輸與貯存要求進(jìn)行運(yùn)輸或貯存。
2 直接與產(chǎn)品接觸的包裝材料必須無(wú)毒、無(wú)害、清潔，產(chǎn)品的所有包裝材料必須具有足夠的密封性和牢固性以達(dá)到保證產(chǎn)品在正常的運(yùn)輸與貯存條件下不受污染的目的。
產(chǎn)品標(biāo)識(shí)要求
1 產(chǎn)品標(biāo)識(shí)應(yīng)符合《中華人民共和國(guó)產(chǎn)品質(zhì)量法》的規(guī)定，并在產(chǎn)品包裝上標(biāo)明執(zhí)行的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)號(hào)以及生產(chǎn)日期和保質(zhì)期（有效期）或生產(chǎn)批號(hào)和限定使用日期。
2 消毒級(jí)產(chǎn)品還應(yīng)在銷售包裝上注明“消毒級(jí)”字樣以及消毒日期和有效期或消毒批號(hào)和限定使用日期，在運(yùn)輸包裝上標(biāo)明“消毒級(jí)”字樣以及消毒單位與地址、消毒方法、消毒日期和有效期或消毒批號(hào)和限定使用日期。
附 錄 A
（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）
產(chǎn)品毒理學(xué)測(cè)試方法
A1 各類產(chǎn)品毒理學(xué)測(cè)試指標(biāo)
當(dāng)原材料、生產(chǎn)工藝等發(fā)生變化可能影響產(chǎn)品毒性時(shí)，應(yīng)按表A1根據(jù)不同產(chǎn)品種類提供有效的（經(jīng)政府認(rèn)定的第三方）成品毒理學(xué)測(cè)試報(bào)告。
表A1
A2 試驗(yàn)方法
皮膚刺激試驗(yàn)、陰道粘膜刺激試驗(yàn)和皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)方法按衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（第三版）第一分冊(cè)《實(shí)驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》（1999）中的“消毒劑毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)”中相應(yīng)的試驗(yàn)方法進(jìn)行。
固體產(chǎn)品的樣品制備方法按照A3進(jìn)行。
注
1 用于皮膚刺激試驗(yàn)中的空白對(duì)照應(yīng)為：生理鹽水和斑貼紙。
2 在皮膚變態(tài)反應(yīng)中，致敏處理和激發(fā)處理所用的劑量保持一致。
A3 樣品制備
A3.1 皮膚刺激試驗(yàn)和皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)
以橫斷方式剪一塊斑貼大小的產(chǎn)品。對(duì)于干的產(chǎn)品，如尿布、婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品，用生理鹽水潤(rùn)濕后貼到皮膚上，再用斑貼紙覆蓋。濕的產(chǎn)品，如濕巾，則可以按要求裁剪合適的面積，直接貼到皮膚上，再用斑貼紙覆蓋。
A3.2 陰道粘膜刺激試驗(yàn)
A3.2.1 干的產(chǎn)品（如婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品）
以橫斷方式剪取足夠量的產(chǎn)品，按1g/10mL的比例加入滅菌生理鹽水，密封于萃取容器中攪拌后置于37℃±1℃下放置24h。冷卻到室溫，攪拌后析取樣液備檢。
A3.2.2 濕的產(chǎn)品（如衛(wèi)生濕巾）
在進(jìn)行陰道粘膜刺激試驗(yàn)的當(dāng)天，擠出濕巾里的添加液作為試樣。
A4 判定標(biāo)準(zhǔn)
以衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（第三版）第一分冊(cè)《實(shí)驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》（1999）中“毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的終判定”的相應(yīng)部分作為試驗(yàn)結(jié)果判定原則。
附錄B
（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）
產(chǎn)品微生物檢測(cè)方法
B1 產(chǎn)品采集與樣品處理
于同一批號(hào)的三個(gè)運(yùn)輸包裝中至少抽取12個(gè)小銷售包裝樣品，1／4樣品用于檢測(cè)，1／4樣品用于留樣，另1／2樣品（可就地封存）必要時(shí)用于復(fù)檢。抽樣的小銷售包裝不應(yīng)有破裂，檢驗(yàn)前不得啟開(kāi)。
在100級(jí)凈化條件下用無(wú)菌方法打開(kāi)用于檢測(cè)的至少3個(gè)包裝，從每個(gè)包裝中取樣，準(zhǔn)確稱取10 g±1g樣品，剪碎后加入到200 mL滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個(gè)生理鹽水樣液。液體產(chǎn)品用原液直接做樣液。
如被檢樣品含有大量吸水樹(shù)脂材料而導(dǎo)致不能吸出足夠樣液時(shí)，稀釋液量可按每次50mL遞增，直到能吸出足夠測(cè)試用樣液。在計(jì)算細(xì)菌菌落總數(shù)與真菌菌落總數(shù)時(shí)應(yīng)調(diào)整稀釋度。
B2 細(xì)菌菌落總數(shù)與初始污染菌檢測(cè)方法
本方法適用于產(chǎn)品初始污染菌與細(xì)菌菌落總數(shù)（以下統(tǒng)稱為細(xì)菌菌落總數(shù)）檢測(cè)。
B2.1 操作步驟
待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作菌落計(jì)數(shù)。共接種5個(gè)平皿，每個(gè)平皿中加入1 mL樣液，然后用冷卻至45℃左右的熔化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15 ～20mL倒入每個(gè)平皿內(nèi)混合均勻。待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置35℃±2℃ 培養(yǎng)48h后，計(jì)算平板上的菌落數(shù)。
B2.2 結(jié)果報(bào)告
菌落呈片狀生長(zhǎng)的平板不宜采用；計(jì)數(shù)符合要求的平板上的菌落，按式(B1)計(jì)算結(jié)果：
當(dāng)菌落數(shù)在100以內(nèi)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)采用二位有效數(shù)字。
如果樣品菌落總數(shù)超過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，按B2.3進(jìn)行復(fù)檢和結(jié)果報(bào)告。
B2.3 復(fù)檢方法
將留存的復(fù)檢樣品依前法復(fù)測(cè)2次，2次結(jié)果平均值都達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，則判定被檢樣品合格；其中有任何1次結(jié)果平均值超過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則判定被檢樣品不合格。
B3 大腸菌群檢測(cè)方法
B3.1 操作步驟
取樣液5mL接種50mL乳糖膽鹽發(fā)酵管，置35℃±2℃ 培養(yǎng)24 h，如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報(bào)告為大腸菌群陰性。
如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則劃線接種伊紅美藍(lán)瓊脂平板，置35℃±2℃培養(yǎng)18～24 h，觀察平板上菌落形態(tài)。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤(rùn)，常具有金屬光澤，也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紅色，中心較深的菌落。
取疑似大腸菌落1～2個(gè)作革蘭氏染色鏡檢，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置35℃±2℃培養(yǎng)24 h，觀察產(chǎn)氣情況。
B3.2 結(jié)果報(bào)告
凡乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在伊紅美藍(lán)平板上有典型大腸菌落，革蘭氏染色為陰性無(wú)芽胞桿菌，可報(bào)告被檢樣品檢出大腸桿菌。
B4 綠膿桿菌檢測(cè)方法
B4.1 操作步驟
取樣液5 mL，加入到50 mL SCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35℃±2℃培養(yǎng)18～24 h。如有綠膿桿菌生長(zhǎng)，培養(yǎng)液表面呈現(xiàn)一層薄菌膜，培養(yǎng)液常呈黃綠色或藍(lán)綠色。從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板，置35℃±2℃培養(yǎng)18～24 h，觀察菌落特征。綠膿桿菌在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周圍培養(yǎng)基略帶粉紅色，其他菌不長(zhǎng)。
取可疑菌落涂片作革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性菌者應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：
氧化酶試驗(yàn)：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無(wú)菌玻棒挑取可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1％二甲基對(duì)苯二胺試液，30 s內(nèi)出現(xiàn)粉紅色或紫紅色，為氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，不變色者為陰性。
綠膿菌素試驗(yàn)：取2～3個(gè)可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基斜面，35℃±2℃培養(yǎng)24 h，加入三氯甲烷3～5 mL，充分振蕩使培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三氯甲烷呈藍(lán)色時(shí)，用吸管移到另一試管中并加入1 mol/L的鹽酸1 mL，振蕩后靜置片刻。如上層出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽(yáng)性，表示有綠膿菌素存在。
硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)：挑取被檢菌純培養(yǎng)物接種在硝酸鹽胨水培養(yǎng)基中，置35℃±2℃培養(yǎng)24 h，培養(yǎng)基小倒管中有氣者即為陽(yáng)性。
明膠液化試驗(yàn)：取可疑菌落純培養(yǎng)物，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內(nèi)，置35℃±2℃培養(yǎng)24h，取出放于4～10℃，如仍呈液態(tài)為陽(yáng)性，凝固者為陰性。
42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)：挑取可疑培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置42℃培養(yǎng)24～48 h，有綠膿桿菌生長(zhǎng)為陽(yáng)性。
B4.2 結(jié)果報(bào)告
被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，證實(shí)為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶及綠膿桿菌試驗(yàn)均為陽(yáng)性者，即可報(bào)告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。如綠膿菌素試驗(yàn)陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)三者皆為陽(yáng)性時(shí)，仍可報(bào)告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。
B5 金黃色葡萄球菌檢測(cè)方法
B5.1 操作步驟
取樣液5 mL，加入到50 mL SCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35℃±2℃培養(yǎng)24 h。
自上述增菌液中取1～2接種環(huán)，劃線接種在血瓊脂培養(yǎng)基上，置35℃±2℃培養(yǎng)24～48 h。在血瓊脂平板上該菌菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。
挑取典型菌落，涂片作革蘭氏染色鏡檢，金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽(yáng)性球菌，排列成葡萄狀，無(wú)芽胞與莢膜。鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：
甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：取上述菌落接種甘露醇培養(yǎng)液，置35℃±2℃培養(yǎng)24 h，發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸者為陽(yáng)性。
血漿凝固酶試驗(yàn)：玻片法：取清潔干燥載玻片，一端滴加一滴生理鹽水，另一端滴加一滴兔血漿，挑取菌落分別與生理鹽水和血漿混合，5 min如血漿內(nèi)出現(xiàn)團(tuán)塊或顆粒狀凝塊，而鹽水滴仍呈均勻混濁無(wú)凝固則為陽(yáng)性，如兩者均無(wú)凝固則為陰性。凡鹽水滴與血漿滴均有凝固現(xiàn)象，再進(jìn)行試管凝固酶試驗(yàn)； 試管法：吸取1∶4新鮮血漿0.5 mL，放滅菌小試管中，加入等量待檢菌24 h肉湯培養(yǎng)物0.5 mL。混勻，放35℃±2℃溫箱或水浴中，每半小時(shí)觀察一次，24 h之內(nèi)呈現(xiàn)凝塊即為陽(yáng)性。同時(shí)以已知血漿凝固酶陽(yáng)性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)物各0.5 mL作陽(yáng)性與陰性對(duì)照。
B5.2 結(jié)果報(bào)告
凡在瓊脂平板上有可疑菌落生長(zhǎng)，鏡檢為革蘭氏陽(yáng)性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性者，可報(bào)告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。
B6 溶血性鏈球菌檢測(cè)方法
B6.1 操作步驟
取樣液5 mL加入到50 mL葡萄糖肉湯，35℃±2℃培養(yǎng)24 h。
將培養(yǎng)物劃線接種血瓊脂平板，35℃±2℃培養(yǎng)24 h觀察菌落特征。溶血性鏈球菌在血平板上為灰白色，半透明或不透明，針尖狀突起，表面光滑，邊緣整齊，周圍有無(wú)色透明溶血圈。
挑取典型菌落作涂片革蘭氏染色鏡檢，應(yīng)為革蘭氏陽(yáng)性，呈鏈狀排列的球菌。鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：
鏈激酶試驗(yàn)：吸取草酸鉀血漿0.2 mL(0.01 g草酸鉀加5 mL兔血漿混勻，經(jīng)離心沉淀，吸取上清液)，加入0.8 mL滅菌生理鹽水，混勻后再加入待檢菌24 h肉湯培養(yǎng)物0.5 mL和0.25％氯化鈣0.25 mL，混勻，放35℃±2℃水浴中，2 min觀察一次(一般10 min內(nèi)可凝固)，待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄溶化時(shí)間。如2 h內(nèi)不溶化，繼續(xù)放置24 h觀察，如凝塊全部溶化為陽(yáng)性，24 h仍不溶化為陰性。
桿菌肽敏感試驗(yàn)：將被檢菌菌液涂于血平板上，用滅菌鑷子取每片含0.04單位桿菌肽的紙片放在平板表面上，同時(shí)以已知陽(yáng)性菌株作對(duì)照，在35℃±2℃下放置18～24 h，有抑菌帶者為陽(yáng)性。
B6.2 結(jié)果報(bào)告
鏡檢革蘭氏陽(yáng)性鏈狀排列球菌，血平板上呈現(xiàn)溶血圈，鏈激酶和桿菌肽試驗(yàn)陽(yáng)性，可報(bào)告被檢樣品檢出溶血性鏈球菌。
B7 真菌菌落總數(shù)檢測(cè)方法
B7.1 操作步驟
待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作真菌計(jì)數(shù)，共接種5個(gè)平皿，每一個(gè)平皿中加入1mL樣液，然后用冷卻至45℃左右的熔化的沙氏瓊脂培養(yǎng)基15～25 mL倒入每個(gè)平皿內(nèi)混合均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置25℃±2℃培養(yǎng)7天，分別于3、5、7天觀察，計(jì)算平板上菌落數(shù)，如果發(fā)現(xiàn)菌落蔓延，以前一次的菌落計(jì)數(shù)為準(zhǔn)。
B7.2 結(jié)果報(bào)告
菌落呈片狀生產(chǎn)的平板不宜采用；計(jì)數(shù)符合要求的平板上的菌落，按式（B2）計(jì)算結(jié)果：
當(dāng)菌落數(shù)在100以內(nèi)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)采用二位有效數(shù)字。
如果樣品菌落總數(shù)超過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，按B7.3進(jìn)行復(fù)檢和結(jié)果報(bào)告。
B7.3 復(fù)檢方法
將留存的復(fù)檢樣品依前法復(fù)測(cè)2次，2次結(jié)果都達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，則判定被檢樣品合格，其中有任何1次結(jié)果超過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則判定被檢樣品不合格。
B8 真菌定性檢測(cè)方法
B8.1 操作步驟
取樣液5mL加入到50mL沙氏培養(yǎng)基中，25℃±2℃培養(yǎng)7天，逐日觀察有無(wú)真菌生長(zhǎng)。
B8.2 結(jié)果報(bào)告
培養(yǎng)管混濁應(yīng)轉(zhuǎn)種沙氏瓊脂培養(yǎng)基，證實(shí)有真菌生長(zhǎng)，可報(bào)告被檢樣品檢出真菌。
附 錄 C
（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）
產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性測(cè)試方法
C1 樣品采集
為使樣品具有良好的代表性，應(yīng)于同一批號(hào)三個(gè)運(yùn)輸包裝中至少隨機(jī)抽取20件小銷售包裝樣品，其中5件留樣，5件做抑菌或殺菌性能測(cè)試，10件做穩(wěn)定性測(cè)試。
C2 試驗(yàn)菌與菌液制備
C2.1 試驗(yàn)菌
C2.1.1 細(xì)菌：金黃色葡萄球菌 (ATCC 6538)，大腸桿菌 (8099或ATCC 25922)。
C2.1.2 酵母菌：白色念珠菌（ATCC 10231）。
菌液制備：取菌株第3～14代的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物(18～24h)，用5mL0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（以下簡(jiǎn)稱PBS）洗下菌苔，使菌懸浮均勻后用上述PBS稀釋至所需濃度。
C3 殺菌性能試驗(yàn)方法
該試驗(yàn)取樣部位，根據(jù)被試產(chǎn)品生產(chǎn)者的說(shuō)明而確定。
C3.1 中和劑鑒定試驗(yàn)
進(jìn)行殺菌性能測(cè)試必須通過(guò)以下中和劑鑒定試驗(yàn)。
C3.1.1試驗(yàn)分組
1)染菌樣片＋5mLPBS
2)染菌樣片＋5mL中和劑
3)染菌對(duì)照片＋5mL中和劑
4)樣片＋5mL中和劑＋染菌對(duì)照片
5)染菌對(duì)照片＋5mLPBS
6)同批次PBS
7)同批次中和劑
8)同批次培養(yǎng)基。
C3.1.2 評(píng)價(jià)規(guī)定
1)第1組無(wú)試驗(yàn)菌，或僅有極少數(shù)試驗(yàn)菌菌落生長(zhǎng)。
2)第2組有較第1組為多，但較第3、4、5組為少的試驗(yàn)菌生長(zhǎng)，并符合要求。
3)第3、4、5組有相似量試驗(yàn)菌生長(zhǎng)，并在1×104～9×104cfu/片之間，其組間菌落數(shù)誤差率不超過(guò)15％。
4)第6～8組無(wú)菌生長(zhǎng)。
5)連續(xù)3次試驗(yàn)取得合格評(píng)價(jià)。
C3.2 殺菌試驗(yàn)
C3.2.1 操作步驟
將試驗(yàn)菌24h斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，制成菌懸液（要求的濃度為：用100μL滴于對(duì)照樣片上，回收菌數(shù)為1×104～9×104cfu/片）。
取被試樣片（2.0cm×3.0cm）和對(duì)照樣片（與試樣同質(zhì)材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經(jīng)滅菌處理）各4片，分成4組置于4個(gè)滅菌平皿內(nèi)。
取上述菌懸液，分別在每個(gè)被試樣片和對(duì)照樣片上滴加100μL，均勻涂布，開(kāi)始計(jì)時(shí)，作用2、5、10、20min，用無(wú)菌鑷分別將樣片投入含5mL相應(yīng)中和劑的試管內(nèi)，充分混勻，作適當(dāng)稀釋，然后取其中2～3個(gè)稀釋度，分別吸取0.5mL置于兩個(gè)平皿，用涼至40～45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細(xì)菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（酵母菌）15mL作傾注，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其充分均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，35℃±2℃培養(yǎng)48h（細(xì)菌）或72h（酵母菌），作活菌菌落計(jì)數(shù)。
試驗(yàn)重復(fù)3次，按式（C1）計(jì)算殺菌率：
X3＝(A-B)/A×100%．．．（C1）
C3.2.2 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
殺菌率≥90％，產(chǎn)品有殺菌作用。
C4 溶出性抗（抑）菌產(chǎn)品抑菌性能試驗(yàn)方法
C4.1 操作步驟
將試驗(yàn)菌24h斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，制成菌懸液（要求的濃度為：用100μL滴于對(duì)照樣片上或5mL樣液內(nèi)，回收菌數(shù)為1×104～9×104cfu/片或mL）。
取被試樣片（2.0cm×3.0cm）或樣液（5mL）和對(duì)照樣片或樣液（與試樣同質(zhì)材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經(jīng)滅菌處理）各4片（置于滅菌平皿內(nèi)）或4管。
取上述菌懸液，分別在每個(gè)被試樣片或樣液和對(duì)照樣片或樣液上或內(nèi)滴加100μL，均勻涂布／混合，開(kāi)始計(jì)時(shí)，作用2、5、10、20min，用無(wú)菌鑷分別將樣片或樣液（0.5mL）投入含5mLPBS的試管內(nèi)，充分混勻，作適當(dāng)稀釋，然后取其中2～3個(gè)稀釋度，分別吸取0.5mL，置于兩個(gè)平皿，用涼至40～45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細(xì)菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（酵母菌）15mL作傾注，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其充分均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，35℃±2℃培養(yǎng)48h（細(xì)菌）或72h（酵母菌），作活菌菌落計(jì)數(shù)。
試驗(yàn)重復(fù)3次，按式（C2）計(jì)算抑菌率：
X4＝(A-B)/A×100%．．．（C1）
C4.2 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
抑菌率≥50％～90％，產(chǎn)品有抑菌作用，抑菌率≥90％，產(chǎn)品有較強(qiáng)抑菌作用。
C5 非溶出性抗（抑）菌產(chǎn)品抑菌性能試驗(yàn)方法
C5.1 操作步驟
稱取被試樣片（剪成1.0cm×1.0cm大小）0.75g分裝包好。
將0.75g重樣片放入一個(gè)250mL的三角燒瓶中，分別加入70mLPBS和5mL菌懸液，使菌懸液在PBS中的濃度為1×104～9×104cfu/mL。
將三角燒瓶固定于振蕩搖床上，以300r/min振搖1h。
取0.5mL振搖后的樣液，或用PBS做適當(dāng)稀釋后的樣液，以瓊脂傾注法接種平皿，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。
同時(shí)設(shè)對(duì)照樣片組和不加樣片組，對(duì)照樣片組的對(duì)照樣片與被試樣片同樣大小，但不含抗菌成分，其他操作程序均與被試樣片組相同，不加樣片組分別取5mL菌懸液和70mLPBS加入一個(gè)250mL三角燒瓶中，混勻，分別于0時(shí)間和振蕩1h后，各取0.5mL菌懸液與PBS的混合液做適當(dāng)稀釋，然后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。
試驗(yàn)重復(fù)3次，按式（C3）計(jì)算抑菌率：
X5＝(A-B)/A×100%．．．（C1）
C5.2 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
不加樣片組的菌落數(shù)在1×104～9×104cfu/mL之間，且樣品振蕩前后平均菌落數(shù)差值在10％以內(nèi)，試驗(yàn)有效；被試樣片組抑菌率與對(duì)照樣片組抑菌率的差值＞26％，產(chǎn)品具有抗菌作用。
C6 穩(wěn)定性測(cè)試方法
C6.1 測(cè)試條件
C6.1.1 自然留樣：將原包裝樣品置室溫下至少1年，每半年進(jìn)行抑菌或殺菌性能測(cè)試。
C6.1.2 加速試驗(yàn)：將原包裝樣品置54～57℃恒溫箱內(nèi)14天或37～40℃恒溫箱內(nèi)3個(gè)月，保持相對(duì)濕度＞75％，進(jìn)行抑菌或殺菌性能測(cè)試。
C6.2 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
產(chǎn)品經(jīng)自然留樣，其殺菌率或抑菌率達(dá)到附錄C3或附錄C4、附錄C5中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值，產(chǎn)品的殺菌或抑菌作用在室溫下的保持時(shí)間即為自然留樣時(shí)間。
產(chǎn)品經(jīng)54℃加速試驗(yàn)，其殺菌率或抑菌率達(dá)到附錄C3或附錄C4、附錄C5中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值，產(chǎn)品的殺菌或抑菌作用在室溫下至少保持一年。
產(chǎn)品經(jīng)37℃加速試驗(yàn)，其殺菌率或抑菌率達(dá)到附錄C3或附錄C4、附錄C5中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值，產(chǎn)品的殺菌或抑菌作用在室溫下至少保持二年。
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